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基因擴(kuò)增儀的使用及分類

發(fā)布時(shí)間: 2022-11-23  點(diǎn)擊次數(shù): 1831次
  基因擴(kuò)增儀是利用PCR,聚合酶鏈反應(yīng))技術(shù)對(duì)特殊DNA擴(kuò)增的一種儀器設(shè)備??蛇x擇梯度運(yùn)算功能,用戶可預(yù)測(cè)溫度曲線。整個(gè)梯度顯示非常好的線性關(guān)系。計(jì)算的溫度與實(shí)測(cè)溫度非常接近。主要用于用于定性PCR基因擴(kuò)增、熒光/酶免終點(diǎn)定量DNA基因擴(kuò)增、基因芯片等其他基因分析應(yīng)用的基因擴(kuò)增等。
  使用步驟:
  1、準(zhǔn)備好反應(yīng)管;
  2、打開(kāi)機(jī)蓋,將反應(yīng)管平穩(wěn)、端正的置入,蓋好機(jī)蓋;
  3、打開(kāi)電源開(kāi)關(guān),按照機(jī)器屏幕顯示的提示設(shè)定程序,待風(fēng)機(jī)停止工作關(guān)閉電源;
  4、機(jī)器工作時(shí)嚴(yán)禁打開(kāi)機(jī)蓋;
  5、要定期使用肥皂水潔洗儀器的樣品槽,不能使用強(qiáng)堿,高濃度酒精和有機(jī)溶劑擦洗。
  基因擴(kuò)增儀分類:
  1、普通的基因擴(kuò)增儀
  把一次PCR擴(kuò)增只能運(yùn)行一個(gè)特別退火溫度的PCR儀,也叫普通PCR儀。如果要做不同的退火溫度需要多次運(yùn)行。主要是做簡(jiǎn)單的,對(duì)目的基因退火溫度的擴(kuò)增。
  2、梯度基因擴(kuò)增儀
  把一次性PCR擴(kuò)增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件(溫度梯度),通常有12種溫度梯度,這樣的儀器就叫梯度PCR儀。因?yàn)楸粩U(kuò)增的不同DNA片段,其最適退火溫度事不同,通過(guò)設(shè)置一系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增,從而一次性PCR擴(kuò)增,就可以篩選出表達(dá)量高的*適退火溫度,進(jìn)行有效的擴(kuò)增。
  3、原位基因擴(kuò)增儀
  用于從細(xì)胞內(nèi)靶DNA的定位分析的細(xì)胞內(nèi)基因擴(kuò)增儀,是保持細(xì)胞或組織的完整性,使PCR反應(yīng)體系滲透到組織和細(xì)胞中,在細(xì)胞的靶DNA所在的位置上進(jìn)行基因擴(kuò)增,不但可以檢測(cè)到靶DNA,又能標(biāo)出靶序列在細(xì)胞內(nèi)的位置。
  4、實(shí)時(shí)熒光定量基因擴(kuò)增儀
  在普通PCR儀的基礎(chǔ)上增加一個(gè)熒光信號(hào)采集系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng),就成了熒光定量PCR儀。其PCR擴(kuò)增原理和普通PCR儀擴(kuò)增原理相同,只是PCR擴(kuò)增時(shí)加入的引物是利用同位素、熒光素等進(jìn)行標(biāo)記,使用引物和熒光探針同時(shí)與模板特異性結(jié)合擴(kuò)增。
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